高速逆流色譜技術(shù)簡介
高速逆流色譜 （ high-speed countercurrent chromatography ， HSCCC ）是 20 世紀(jì) 80 年代發(fā)展起來的一種連續(xù)高效的液—液分配色譜分離技術(shù)， 它不用任何固態(tài)的支撐物或載體。 它利用兩相溶劑體系在高速旋轉(zhuǎn)的螺旋管內(nèi)建立起一種特殊的單向性流體動力學(xué)平衡，當(dāng)其中一相作為固定相，另一相作為流動相，在連續(xù)洗脫的過程中能保留大量固定相。
由于不需要固體支撐體，物質(zhì)的分離依據(jù)其在兩相中分配系數(shù)的不同而實現(xiàn)，因而避免了因不可逆吸附而引起的樣品損失、失活、變性等，不僅使樣品能夠全部回收，回收的樣品更能反映其本來的特性，特別適合于天然生物活性成分的分離。而且由于被分離物質(zhì)與液態(tài)固定相之間能夠充分接觸，使得樣品的制備量大大提高，是一種理想的制備分離手段。
它相對于傳統(tǒng)的固—液柱色譜技術(shù)，具有適用范圍廣、操作靈活、高效、快速、制備量大、費用低等優(yōu)點。目前 HSCCC 技術(shù)正在發(fā)展成為一種備受關(guān)注的新型分離純化技術(shù)，已經(jīng)廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)藥、天然產(chǎn)物、食品和化妝品等領(lǐng)域， 特別在天然產(chǎn)物行業(yè)中已被認(rèn)為是一種有效的新型分離技 術(shù)；適合于中小分子類物質(zhì)的分離純化。
我國是繼美國、日本之后最早開展逆流色譜應(yīng)用的國家，俄羅斯、法國、英國、瑞士等國也都開展了此項研究。美國 FDA 及世界衛(wèi)生組織（ WHO ）都引用此項技術(shù)作為抗生素成分的分離檢定， 90 年代以來，高速逆流色譜被廣泛地應(yīng)用于天然藥物成分的分離制備和分析檢定中。
逆流色譜原理：
1. 逆流色譜是20世紀(jì)50年代源于多極萃取技術(shù)（非連續(xù)性）
但是多極萃取設(shè)備龐大復(fù)雜、易碎、溶劑體系容易乳化，溶劑耗量大，分離時間長。
2. 20世紀(jì)70年代，出現(xiàn)了液滴逆流色譜（DCCC）
特點：（1）流體靜力學(xué)原理（Hydrostatic equilibrium system，HSES）
（2）分離時間過長、連接處容易出現(xiàn)滲漏等
3.20世紀(jì)70年代出現(xiàn)了離心分配色譜儀（Centrifugal partition chromatography，CPC）
特點： （1）基于流體靜力學(xué)原理（Hydrostatic equilibrium system，HSES），利用公轉(zhuǎn)產(chǎn)生的單一力場
（2） 連接處較多而且容易出現(xiàn)滲漏，清洗維護復(fù)雜
4．20世紀(jì)80年開始出現(xiàn)了現(xiàn)在的高速逆流色譜，可稱為最先進的逆流色譜
特點：（1） 基于流體動力學(xué)原理（Hydrodynamic equilibrium system，HDES）
（2） 通過公轉(zhuǎn)、自轉(zhuǎn)（同步行星式運動）產(chǎn)生的二維力場，保留兩相中的其中一相作為固定相
（3）通過高速旋轉(zhuǎn)提高兩相溶劑的萃取頻率，1000rpm旋轉(zhuǎn)時可達(dá)到17次/s頻率的萃取過程。
5.HSCCC分離流程圖
應(yīng)用領(lǐng)域：
（ 1 ）天然產(chǎn)物已知有效成分的分離純化
（ 2 ）化學(xué)合成物質(zhì)的分離純化
（ 3 ）中藥一類、五類新藥的開發(fā)
（ 4 ）中藥指紋圖譜和質(zhì)量控制研究
（ 5 ）抗生素的分離純化
（ 6 ）天然產(chǎn)物未知有效成分的分離純化（新化合物開發(fā)）
（ 7 ）海洋生物活性成分的分離純化
（ 8 ）放射性同位素分離
（ 9 ）多肽和蛋白質(zhì)等生物大分子分離以及手性分離等
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